Análise da interação de Leishmania braziliensis e Leishmania infantum com células dendríticas humanas

Abstract

A leishmaniose é uma doença tropical negligenciada, que está associada a população de vulnerabilidade, com baixo poder socioeconômico, que possui duas formas clínicas principais, leishmaniose visceral (LV) e a leishmaniose cutânea (LC). Sendo que no Brasil os protozoários das espécies, Leishmania infantum e Leishmania braziliensis, são os principais agentes etiológicos responsáveis pela LV e LC, respectivamente. A Leishmania no Brasil é transmitida através do vetor do gênero Lutzomyia, que no momento da hematofagia inocula os parasitos no hospedeiro humano, nas formas promastigotas metacíclicas, que podem ser reconhecidas por células dendríticas (DCs). As DCs são de extrema importância, pois conectam a imunidade inata à adaptativa, por sua capacidade de ativar linfócitos e mediar a resposta imune, protegendo o hospedeiro na infecção causada pelo parasito. Porém, já foi observado que a Leishmania é capaz de modular a resposta destas células interferindo na condução da resposta imune e, por consequência estabelece a infecção e a persistência do mesmo. Portanto, o objetivo deste trabalho foi analisar a infecção de DCs por L. infantum e L. braziliensis, e se estas espécies de Leishmania modulam a expressão de moléculas de superfícies em DCs. Métodos: Para isso, foram utilizados monócitos do sangue periférico de humanos, provenientes de buffy coats, cedidas pela Fundação Hemocentro de Brasília. Os monócitos foram submetidos a indução da diferenciação em DCs em cultura suplementada com IL-4 e GM-CSF. Após 7 dias, as DCs foram incubadas com L. infantum ou L. braziliensis, previamente marcadas com CFSE. Depois de 24h, as moléculas de superfície de DCs foram marcadas com anticorpos e adquiridas por citometria de fluxo. Resultados: Por citometria de fluxo foi observado que L. braziliensis e L. infantum tiveram capacidade de infectar as DCs. As espécies de L. braziliensis e L. infantum não mostraram capacidade de modular a expressão de moléculas de caracterização fenotípicas de diferenciação em DCs com as moléculas CD1a e CD11c. Porém, L. infantum induziu um perfil de migração em DCs pelo aumento da expressão da molécula CCR7. Além disso, L. infantum induziu um perfil de

maturação observado pelo aumento da expressão da molécula CD83 e da molécula co- estimuladora CD80 em DCs infectada apenas. Contudo não induziram a alteração da

expressão de outras moléculas relacionadas a apresentação de antígenos como, HLA-DR, CD40 e CD86, nem a expressão da molécula inibidora PD-L1. Já L. braziliensis não mostrou o mesmo comportamento que L. infantum, pois não induziu a alteração da expressão de nenhuma destas moléculas em DCs. Conclusão: Diante disso DCs infectadas por L. infantum adquirem um perfil de migração, maturação e com maior capacidade de ativar linfócitos T. O mesmo não ocorre em células dendríticas infectadas por L. braziliensis.