Miméticos de hemácias como sistemas de liberação de hidrolisados de hemoglobina com atividades antitumorais in vitro

Abstract

Devido à alta taxa de mortalidade por câncer todos os anos e em virtude dos tratamentos frequentemente utilizados causarem severos efeitos adversos devido à sua ação em células sadias, surge a necessidade pela busca por agentes ativos mais específicos para as células tumorais bem como a busca por mecanismos de transportes de bioativos mais eficientes. Nesse sentido o desenvolvimento de sistemas estruturados em hemácias torna-se promissor uma vez que essas células podem fornecer o arcabouço para o transporte desses ativos bem como fornecer peptídeos com atividade antitumoral a partir da hidrólise da hemoglobina. O objetivo do presente estudo foi desenvolver sistemas de liberação e entrega de hidrolisados de hemoglobina com ações antitumorais utilizando hemácias e avaliar seus efeitos sobre linhagens de células tumorais (4T1) e normais de mamíferos (NIH3T3), in vitro. O hidrolisado de hemoglobina livre, bem como o hidrolisado encapsulado em sistemas miméticos baseados em hemácias, lipossomos, partículas de quitosana e partículas de quitosana com polietilenoglicol tiveram suas características avaliadas por microscopia de força atômica, microscopia eletrônica de varredura, espalhamento de luz dinâmico e suas possíveis atividades foram testadas contra células de câncer de mama e fibroblasto. O hidrolisado tríptico de hemoglobina livre não diminuiu expressivamente in vitro a viabilidade de células 4T1 e NIH3T3. Os miméticos de hemácias na ausência e presença do hidrolisado de hemoglobina apresentaram formas irregulares, tamanho micrométrico, alta polidispersividade (0,66 a 1,0) e citotoxicidade contra células NIH3T3 (17%) na ausência do hidrolisado de hemoglobina e contra células 4T1 na presença do hidrolisado. Os miméticos de hemácias bem como os lipossomos também apresentaram carga de superfície negativa e se mostraram instáveis coloidalmente. Adicionalmente, apresentaram tamanhos micrométricos e nanométricos, respectivamente. Todos os outros sistemas apresentaram tamanhos nanométricos, polidispersividade na faixa de 0,34 a 1,0 e boa estabilidade coloidal (±40 a >±60). Partículas de quitosana e quitosana com PEG apresentaram carga superficial positiva e alta estabilidade coloidal. Todos os sistemas nanométricos (lipossomos e baseados em quitosana) apresentaram taxa de encapsulamento entre 78- 89%, sendo que os lipossomos induziram maior diminuição na viabilidade (51%, P<0,05) de células 4T1. A partir dos resultados obtidos foi possível observar que apesar da maioria dos sistemas testados não terem alterado expressivamente a viabilidade das células tumorais, o desenvolvimento de nanossistemas a partir de componentes moleculares encontrados endogenamente nos organismos, como as hemácias, torna-se promissor como tratamentos anticarcinogênicos alternativos e/ou complementares aos já existentes.