Desenvolvimento e avaliação de carreadores lipídicos nanoestruturados contendo ibrutinibe para o tratamento tópico de melanoma

Abstract

O melanoma é um tumor maligno que se desenvolve a partir de melanócitos, sendo responsável por mais de 80% das mortes associadas a doenças cutâneas. Apesar dos avanços recentes nos tratamentos clínicos, a resistência medicamentosa, recidivas e a alta toxicidade dos medicamentos justificam a busca por novas abordagens terapêuticas. O ibrutinibe, um inibidor a tirosina quinase de Bruton, tem sido estudado para tumores sólidos e não-sólidos, porém, seu uso oral está associado a baixa biodisponibilidade oral e reações adversas graves. Este estudo propõe o desenvolvimento de uma formulação dermatológica baseada em carreadores lipídicos nanoestruturados (CLN) para encapsular o ibrutinibe, como uma alternativa eficaz para o tratamento tópico do melanoma. Inicialmente, foi desenvolvido e validado um método analítico por cromatografia líquida de alta eficiência para detecção e quantificação do ibrutinibe na presença dos contaminantes da pele, demonstrando seletividade, sensibilidade, linearidade, precisão, exatidão e alta capacidade de recuperação do ibrutinibe das camadas cutâneas (>89%). Após ensaios de análise de calorimetria diferencial exploratória, análise termogravimétrica e ensaio de solubilidade do fármaco em diferentes óleos, dois nanocarreadores distintos foram propostos: CLN1, com óleo de semente de romã na composição (diâmetro médio de 382,2 ± 25,3 nm, PDI de 0,35 ± 0,09 e eficiência de encapsulação de 91,5 ± 0,2%) e CLN2, com ácido oleico (diâmetro médio de 221,0 ± 2,6 nm, PDI de 0,16 ± 0,03 e eficiência de encapsulação de 96,1 ± 0,7%). Ambos apresentaram pH entre 5,7 e 5,9, e não se mostrarem irritantes em ensaio HET-CAM. O perfil de liberação mostrou que o CLN2 retardou a liberação do fármaco, enquanto o CLN1 não diferiu do controle. Em estudo de permeação cutânea, CLN1 aumentou a penetração do ibrutinibe para a epiderme nas primeiras horas, enquanto o CLN2 aumentou significativamente (p<0,05) a penetração do fármaco após 12 e 24 h de exposição da pela às formulações. A análise espectroscópica de ressonância paramagnética indicou que o CLN2 aumentou a fluidez dos lipídeos presentes no estrato córneo, justificando sua eficácia em tempos prolongados. Dado o seu melhor desempenho, CLN2 foi incorporada a géis de carboximetilcelulose (CMC) em diferentes concentrações, para melhorar as suas características reológicas e viabilizar a aplicação tópica. A formulação contendo 0,25% de CMC (CLN2-gel) apresentou boas características físicas, como diâmetro hidrodinâmico médio e PDI (324,1 ± 4,1 nm, PDI de 0,14 ± 0,03), boas características reológicas, estabilidade e manutenção do perfil de permeação, mesmo com aplicação de massagem. Por fim, CLN2-gel foi avaliado em modelo in vivo de melanoma metastático (B16-F10) em camundongos C57BL/6. O tratamento tópico com CLN2-gel retardou o crescimento tumoral em comparação ao placebo. Quando combinado à dacarbazina intraperitoneal, observou-se uma tendência de redução adicional e estabilização do volume tumoral ajustado. Em resumo, o uso de carreadores lipídicos nanoestruturados, especialmente a formulação CLN2-gel, apresenta-se como uma alternativa promissora para o tratamento tópico do melanoma, principalmente como terapia adjuvante às terapias convencionais, sendo esses dados corroborados em modelo experimental de melanoma metastático.