Modulação quimiogenética do sistema de recompensa em ratos submetidos ao teste de preferência condicionada ao lugar

Abstract

O Transtorno por Uso de Substâncias (TUS) é um problema de saúde global, caracterizado pelo uso recorrente e compulsivo de certas substâncias, apesar das consequências adversas. A neurobiologia do TUS envolve alterações do sistema mesocorticolímbico, também conhecido como sistema de recompensas, em particular das vias dopaminérgicas. O entendimento dos mecanismos subjacentes a este sistema, bem como o impacto do reforço ambiental intrinsicamente ligado ao quadro, é fundamental para o desenvolvimento de terapias mais eficazes. Nesse cenário, a quimiogenética, com o desenvolvimento da técnica de receptor desenhado que se ativa exclusivamente por uma droga desenhada (Designer receptor exclusively activated by designer drugs - DREADDs), possibilita a neuromodulação de circuitos, de maneira temporária, reversível e atóxica, em populações celulares geneticamente definidas, o que agrega ao método uma precisão sem precedentes para o estudo de sistemas e vias neurais específicas. O objetivo do presente trabalho foi avaliar os efeitos comportamentais da modulação quimiogenética da via mesolímbica no paradigma de preferência condicionada ao lugar (conditioning place preference - CPP). CPP em ratos Wistar. Foram utilizados dois vetores virais, ambos expressando receptores inibitórios com tropismo para neurônio e interneurônio, respectivamente, direcionados às regiões do núcleo accumbens e da área tegmental ventral. Os animais foram submetidos ao aparato de CPP mediante ativação dos receptores por Clozapine N – oxide (CNO) 5 mg/Kg i.p. Adicionalmente, o teste de CPP foi realizado com o fármaco cetamina 10 mg/Kg i.p. O delineamento experimental foi separado nas fases de habituação, condicionamento e teste, com pequenas variações entre os grupos de acordo com o protocolo cirúrgico e dados da literatura. As análises estatísticas foram feitas com o software GraphPad Prisma. A modulação do sistema mesolímbico, de maneira isolada, por ambos os vetores, não demonstrou alteração comportamental relevante, tampouco o grupo controle do fármaco ativador CNO demonstrou gerar preferência, ao passo que cetamina demonstrou preferência, quando comparado aos dados da linha de base dos sujeitos experimentais em recortes temporais específicos. A análise histológica comprovou a expressão nos alvos cirúrgicos. Os resultados demonstram que a modulação feita pela quimiogenética não é suficiente para ativar o sistema de recompensa e, desta forma, pode associar a citada metodologia a testes envolvendo substâncias de abuso, a fim de identificar a possibilidade de modular um sistema previamente ativado. A preferência gerada pela cetamina 10 mg/Kg não foi uniforme, sendo necessários mais testes para firmar sua padronização. Os achados proporcionam base para pesquisas que mimetizem o estado neuronal de pacientes do TUS, com intuito de desenvolver alvos terapêuticos farmacológicos mais precisos no tratamento.