Identificação de fitocanabinoides em produtos de cannabis sativa por cromatografia em camada delgada e análise de imagens

Abstract

A Cromatografia em Camada Delgada (CCD) é uma técnica amplamente empregada nas instituições de perícia criminal em razão da simplicidade, baixo custo e alta frequência analítica. Apesar disso, apresenta desvantagens quanto a resolução, a detectabilidade, a reprodutibilidade e a subjetividade na interpretação dos resultados. Para proporcionar medidas mais objetivas dos sinais, diversas ferramentas quimiométricas e a análise de imagens digitais podem ser empregadas. Nesse sentido, o presente estudo visou avaliar a eficiência das separações para a identificação de alguns fitocanabinoides presentes em amostras de Cannabis sativa L. apreendidos pela Polícia Civil do Distrito Federal (PCDF). As amostras foram acondicionadas em microtubos plásticos e submetidas a extração com clorofórmio e à reação colorimétrica com o sais azo Fast Blue B (FBBS) e Fast Blue BB (FBBBS). Em seguida, foram feitas aplicações da fase orgânica em placas de CCD para eluição nas condições cromatográficas estabelecidas para os sistemas TI e TJ. Imagens das placas de CCD foram obtidas primeiramente através de um scanner comum e posteriormente importadas para o Matlab®, onde foram feitos ajustes na resolução e pre-processamentos para a obtenção dos cromatogramas de cada corrida nos diferentes componentes de cor. Após a redução dos ruídos e a correção de linha de base, os resultados de distância de migração, área e altura de pico foram obtidos, os quais apresentaram boa precisão e reprodutibilidade. Por fim, a estequiometria da reação de acoplamento dos fitocanabinoides com os sais azo foi estudada por Cromatografia Líquida acoplada à Espectrometria de Massas de Tempo de Voo (LC TripleTOF). Os ensaios de caracterização demonstraram que apesar do sal azo FBBS apresentar dois grupos diazônios, a reação de acoplamento diazoico ocorre majoritariamente na razão de 1:1 para o THC, CBD e CBN, entretanto ela ocorre na razão de 2:1 para o CBC. THC, CBD, CBN e CBC foram distinguíveis tanto nas análises por LC TripleTOF quanto nas análises por CCD. Os resultados obtidos por CCD com amostras apreendidas foram comparados com os obtidos com padrões analíticos de THC, CBN e CBD, os quais evidenciaram picos bemdefinidos, com boa intensidade e reprodutíveis, além de terem sido obtidas regressões significativas, com R2> 0,92 para a camada azul e saturação. O método se mostrou superior em termos qualitativos ao atualmente empregado na PCDF, mas a reação de acoplamento entre FBBBS e os analitos ainda precisa ser melhor elucidada para prossibilitar a quantificação dos analitos.