Estudo in vitro da eficácia da terapia fotodinâmica mediada por nanocompósitos de ouro-pluronic conjugados ao cloreto de alumínio-ftalocianina no tratamento de câncer de mama

Abstract

A terapia fotodinâmica (TFD) no câncer de mama é limitada pela agregação e instabilidade em meio aquoso de fotossensibilizantes (FS) hidrofóbicos, como o cloreto de alumínio ftalocianina (AlClPc), sendo a nanotecnologia uma estratégia para otimizar suas propriedades físico-químicas e biológicas. O objetivo deste estudo foi avaliar a eficácia da TFD mediada por nanocompósitos de ouro-Pluronic associados ao AlClPc (AuPLU/AlClPc) contra células tumorais murinas. De acordo com o espalhamento dinâmico de luz (DLS), o AuPLU/AlClPc apresentou propriedades coloidais dependentes do meio dispersante, com DH de 200,4 ± 70,27 nm em água e 90,29 ± 36,73 nm em meio fisiológico, PDI variando de 0,49 ± 0,09 a 0,52 ± 0,04 e potencial zeta de -19,80 ± 13,29 mV (água) e –12,64 ± 10,05 mV (meio). A espectroscopia UV-vis revelou bandas características de LSPR entre 520-580 nm e da banda Q do AlClPc entre 670-690 nm, indicando integridade estrutural sob condições de diluição. Ensaios fotoquímicos demonstraram maior geração de espécies reativas de oxigênio (EROs) pelo AuPLU/AlClPc, evidenciada por redução da absorbância do DPBF 50% superior à do AlClPc livre. Após 24 h de tratamento no escuro, o AuPLU/AlClPc apresentou toxicidade dependente da concentração em células 4T1-luc, reduzindo a viabilidade em até 49,71%, enquanto o AlClPc livre reduziu cerca de 30%. Após irradiação precedida de 15 min de incubação com concentrações não tóxicas de AuPLU/AlClPc, a viabilidade de 4T1-luc foi reduzida para aproximadamente 2-3%; em condições equivalentes, o AlClPc livre resultou em ~7%, sem benefício adicional observado para tempos de incubação mais longos (30-60 min). Em fibroblastos NIH-3T3, o AuPLU/AlClPc manteve viabilidade superior a 90% no escuro, enquanto AlClPc livre reduziu a viabilidade em cerca de 24%; após a TFD com 15 min de tratamento, foram observadas viabilidades de aproximadamente 27% (AlClPc) e entre 16-24% (AuPLU/AlClPc), sugerindo seletividade moderada. Do ponto de vista mecanístico, o AuPLU/AlClPc promoveu aumento dos níveis intracelulares de EROs (36% superior ao controle negativo), associado a aproximadamente 77% de fragmentação de DNA e cerca de 94% de lesão de membrana. Em conjunto, os resultados indicam que, apesar da eficácia fotodinâmica semelhante à do FS livre, o AuPLU/AlClPc oferece vantagens como maior estabilidade coloidal, maior eficiência fotoquímica e perfil de segurança aprimorado no escuro, configurando-se como uma plataforma promissora para a otimização da TFD.