Bioengenharia terapêutica : avaliação de citotoxicidade de lipídio sintético em células neoplásicas

Abstract

O câncer é uma das principais causas de mortes em muitos países, apesar das diversas terapias existentes e aplicadas atualmente, nem todas apresentam os resultados desejados. A maioria dos tratamentos afetam tanto as células cancerígenas quanto as células normais, demonstrando a toxicidade desses agentes anticâncer; outro fator é a solubilidade da maioria das moléculas usadas como quimioterápicos e que são altamente hidrofóbicos, limitando assim a eficácia terapêutica, pelo tempo de meia-vida curta que apresentam. A busca de novas terapias e moléculas que levem a um melhor prognóstico da doença, seja na cura ou na qualidade de vida dos pacientes é objetivo incessante dos médicos e cientistas da área. Tal empenho levou a evolução nas terapias farmacológicas que buscam uma ação mais específica do fármaco, como a melhora no reconhecimento de tumores e das células que os constituem, e uma penetração facilitada em células tumorais. É sabido que os lipídios bioativos apresentam alto potencial seletivo e de inibidores de metástases, podendo auxiliar como transportador e biossinalizador, facilitando a entrega do fármaco diretamente no tumor. Alguns lipídios bioativos, assim como a molécula em estudo denominada como 2- aminoetanol-dihidrogenofosfato (PEA), são fosfolipídios sintéticos que apresentam características específicas, atuando na biomodulação das células como: controle proliferativo, funções das organelas, endocitose, autofagia, apoptose, envelhecimento e estresse oxidativo. Assim, este trabalho tem por finalidade avaliar a capacidade antineoplásica da PEA, que não têm como alvo o DNA, mas promovem alterações na membrana plasmática, induzindo a morte celular em células de adenocarcinoma da próstata DU-145, adenocarcinoma de mama humana MCF7 e MDA-MB-235, e Fibroblasto humano. Avaliações físico-químicas e estruturais foram realizadas utilizando a condutometria e in vitro da molécula. Inicialmente os estudos de condutométria por meio de um titulante cem vezes mais concentrado, sendo um ácido forte HCL com pH semelhante ao do estômago, demonstraram dois pontos de inflexão sendo que, no primeiro ponto a molécula forma um dímero com a ligação do hidrogênio, e no segundo, ocorre uma protonação do íon de cloreto, com a molécula gerando uma diminuição da carga do eletrólito.

Nos estudos in vitro, a viabilidade celular foi determinada pelo teste colorimétrico de MTT, como um reflexo da função mitocondrial, após exposição a diferentes concentrações de PEA (0,02 a 500mM) por períodos de 24 e 48 horas. As células de fibroblastos humano não foram afetadas pela incubação com a PEA nos períodos testados, apresentando apenas 10% de células mortas após 48 horas de exposição a concentração de 100 mM. Nas células de tumores mamários MCF7, a toxicidade foi concentração dependente, sendo que as concentrações entre 30 e 40 mM promoveram a morte de cerca de 50% das células, independentemente do tempo de exposição. A linhagem de células MDA-MB-231, o tempo de exposição a molécula promoveu resultados diferentes em 24 horas o IC50 foi com a concentração de 7,81 mM e em 48 horas 50 mM. O comportamento das células prostáticas em 24 horas de tratamento não apresentou toxicidade e em 48 horas de tratamento o IC50 foi com a concentração de 80 mM.