Avaliação da atividade combinatória de antimicrobianos contra Klebsiella pneumoniae e Staphylococcus aureus

Abstract

A disseminação das cepas de Klebsiella pneumoniae, produtora de carbapenemase (KPC+), e Staphylococcus aureus resistente a meticilina (MRSA) tornou-se um problema significativo em todo o mundo. Uma das estratégias desenvolvidas para combater esses microrganismos têm sido a terapia combinada de antimicrobianos. No presente trabalho investigamos a efetividade in vitro e in vivo dos antimicrobianos penicilina G (PNG), cloranfenicol (CAP), estreptomicina (SMA) e cefotaxima (CFT) sozinhos e em combinação contra isolados clínicos de K. pneumoniae e S. aureus. Um isolado clínico de K. pneumoniae KPC+ e um de S. aureus MRSA foram expostos aos antimicrobianos em concentrações variadas durante 24 h. Combinações par-a-par de PNG, CAP, SMA e CFT foram testadas para avaliar suas possíveis interações utilizando o método de checkerboard. O sinergismo foi definido com ICIF ≤ 0,5, bem como a redução da carga bacteriana inicial de 105 CFU.mL-1 após 24h, proveniente das associações. A concentração inibitória mínima (CIM) foi determinada por meio de microdiluição seriada em caldo de acordo com CLSI. A atividade citotóxica dos antimicrobianos livres e em combinação foi avaliada sobre monócitos RAW 264.7, células renais de macaco verde africano (Cercopithecus aethiops) e eritrócitos. Os valores de CIM obtidos para CFT, CAP, SMA e PNG foram respectivamente de 32, 8, 4 e >512 μg.mL-1 contra K. pneumoniae e 256, 64, 4 e 32 μg.mL-1, respectivamente, contra S. aureus. A combinação de CFT + SMA, dentre as demais associações frente K. pneumoniae, apresentou uma efetividade sinérgica de menor valor (ICIF = 0,18), bem como a PNG + SMA contra MRSA (CIF = 0,18). Nenhum dos antibióticos livres e em combinação apresentaram efeitos hemolíticos e citotóxicos frente a células RAW 264.7 e Vero. Os resultados obtidos no presente trabalho sugerem que a combinação entre CFT + SMA e PNG + SMA pode ser uma alternativa terapêutica para o tratamento de infecções causadas K. pneumoniae KPC+ e MRSA, respectivamente.