Pós-bióticos versus fungos : avaliação inibitória in vitro das leveduras Candida glabrata e Cryptococcus neoformans

Abstract

Introdução: Estudos recentes apontam como abordagem promissora o uso dos pró e pósbióticos, por serem capazes de inibir/diminuir o crescimento de determinados micro-organismos patogênicos, além de apresentarem um impacto sobre a seleção de linhagens resistentes a antimicrobianos significativamente menor. Somado ao problema do aumento incontrolável da resistência microbiana, atualmente, constata-se uma notável escassez de agentes antifúngicos disponíveis para o tratamento clínico. Neste cenário, segundo dados da Organização Mundial da Saúde (OMS), as leveduras de Candida glabrata e Cryptococcus neoformans figuram entre as espécies de fungos com riscos alarmantes à saúde humana. Objetivo: Avaliar o efeito dos pós-bióticos de Lactobacillus spp. e do ácido graxo de cadeia curta, Butirato de sódio, sobre crescimento das leveduras patogênicas C. glabrata e C. neoformans. Metodologia: Foram realizadas curvas de crescimento seguindo o protocolo de Concentração Inibitória Mínima (CIM), padronizados de acordo o Comitê Brasileiro de Teste de Sensibilidade aos Antimicrobianos (BrCAST) para ensaio de microdiluição em caldo, com adaptações. Os pósbiótico foram coletados a partir do crescimento isolado das espécies de Lactobacillus casei Shirota, L. casei, L. reuteri e L. rhamnosus, culturas puras e frescas, centrifugadas e posteriormente filtradas com filtro de membrana estéreis. Os meios utilizados para os ensaios de CIM foram: YM (Malte de Leveduras), Sabouraud, MM (Meio Condicionado) e RPMI 1640, acrescidos dos pós-bióticos espécie-específica de Lactobacillus spp. (LAC) (v / v), seguindo diluição seriada. Resultados: Os dados deste estudo demostraram redução do crescimento de ambas as leveduras na presença dos pós-bióticos, com efeito dose-dependente. Dependendo do meio de cultivo aplicado ou da espécie de Lactobacillus no teste de CIM o efeito do pós-biótico também variou. Em Sabouraud e YM, na concentração de 50%, o pós-biótico de L. reuteri reduziu o crescimento de C. glabrata. Em RPMI, na presença dos 4 pós-bióticos testados, houve redução do crescimento de C. glabrata em todas as concentrações avaliadas. Os dados referentes a C. neoformans demostraram uma redução de crescimento com 50% dos pós-bióticos de L. casei e L. rhamnosus em Sabouraud. O pós-biótico de L. Reuteri em Sabouraud e YM também reduziu o crescimento de C. neoformans. Nos meios RPMI e MM, na presença dos 4 pósbióticos, houve redução do crescimento de C. neoformans em todas as concentrações testadas. Para o NaBut em Sabouraud, houve redução do crescimento de C. glabrata em todas as concentrações, mas em RPMI não houve redução. Nos ensaios para C. neoformans, NaBut apresentou redução em Sabouraud e RPMI. Conclusão: Tanto os pós-bióticos de Lactobacillus spp. quanto o NaBut foram capazes de reduzir o crescimento in vitro de leveduras patogênicas de modo dose-dependente, observando que para os Lactobacillus o efeito é espécie-específico. Embora sejam necessários estudos complementares, os dados preliminares apontam que os pósbióticos apresentam efeito inibitório sobre as leveduras e no futuro poderão ser empregados como abordagem complementar aos tratamentos atuais. Além de possuírem a vantagem de menor impacto na seleção de linhagens resistentes aos antifúngicos, economicidade e possibilidade de oferta em regiões de vulnerabilidade econômica.