Caracterização fenotípica e genotípica de dois isolados do alfabaculovírus Chrysodeixis includens nucleopolyhedrovirus (ChinNPV) infectivos para a lagarta falsa-medideira-da-soja, Chrysodeixis includens

Abstract

A lagarta falsa-medideira-da-soja (Chrysodeixis includens) é uma praga agrícola que afeta diversas culturas e representa um desafio significativo para a agricultura. O controle convencional frequentemente depende de inseticidas químicos, que podem prejudicar o meio ambiente e fomentar a resistência nos insetos. Como alternativa mais sustentável, produtos naturais à base do baculovírus Chrysodeixis includens nucleopolyhedrovirus (ChinNPV) têm se destacado no Brasil. Os baculovírus são vírus de DNA de fita dupla circular, que se apresentam em cristais proteicos chamados corpos de oclusão (OBs). O presente trabalho teve como objetivo caracterizar dois novos isolados de ChinNPV, os isolados Tabatinga (Tb) e CNPSo-168 (C168), avaliando aspectos fenotípicos e genômicos, visando aprimorar o uso de baculovírus no controle de pragas. Os isolados foram amplificados em lagartas, semipurificados, quantificados e submetidos a ensaios de dose letal. O DNA viral foi extraído, analisado em gel de agarose e sequenciado por Illumina. As lagartas infectadas com doses letais e subletais passaram por testes para avaliar parâmetros biológicos, como tamanho, taxa de pupação e emergência, além de serem submetidas a curvas de sobrevivência com uma diluição de 1x10⁷ OBs/ mL por 10 dias. A microscopia eletrônica de transmissão (TEM) foi utilizada para análise estrutural dos isolados. Os resultados mostraram que no ensaio de dose letal, o isolado Tb apresentou 33% de mortalidade, enquanto o C168 alcançou 65%. A análise das curvas de sobrevivência indicou que o C168 teve ação mais rápida que o Tb. Os isolados apresentaram efeitos subletais significativos sobre as lagartas sobreviventes, resultando em redução do tamanho corporal, atraso na pupação e diminuição da taxa de emergência de adultos, com impactos mais evidentes nas concentrações virais mais altas. Além disso, algumas mariposas emergentes apresentaram deformidades nas asas, o que comprometeria sua sobrevivência na natureza, evidenciando o potencial dos isolados não apenas como agentes letais, mas também como moduladores do desenvolvimento. A TEM confirmou que ambos os isolados apresentam OBs com múltiplos vírions oclusos, mas cada um contendo um único nucleocapsídeo envelopado. O sequenciamento revelou que o C168 possui um genoma de 139.290 pb com 152 ORFs, enquanto o Tb tem 139.131 pb com 151 ORFs. Ambos os isolados apresentaram alta identidade de nucleotídeos com o isolado de referência ChinNPV-IE (99,44% para C168 e 98,92% para Tb). A reconstrução filogenética indicou que os isolados formam um único clado, com o C168 mais proximamente relacionado ao ChinNPV-IE. Entre as mutações pontuais, destaca-se o gene bro-a, com uma extensão e interrupção abrupta da fase de leitura, além de 24 SNPs comuns a ambos os isolados. Ambos os isolados também apresentaram variação no gene pif-2, com versões curta e longa, resultantes de fusão com uma ORF hipotética. A caracterização dos isolados contribui para a compreensão dos fatores de virulência, das interações inseto-hospedeiro e da variação fenotípica nas populações de baculovírus, oferecendo novas ferramentas para o manejo de pragas agrícolas.