Transferência intrafolicular de ovócitos imaturos (TIFOI) como uma alternativa para a maturação de ovócitos bovinos

Abstract

A maturação ovocitária é uma etapa crítica na produção in vitro de embriões (PIVE) e exerce influência direta sobre a qualidade embrionária, o metabolismo e a competência para o desenvolvimento. Contudo, o ambiente in vitro de maturação ovocitária (MIV) é frequentemente associado ao acúmulo excessivo de lipídios, alterações epigenéticas e baixa criotolerância do embrião produzido. A presente tese avaliou os efeitos de três diferentes sistemas de maturação ovocitária: MIV, superestimulação in vivo, por meio do uso de FSH exógeno (FSH), e Transferência Intrafolicular de Ovócitos Imaturos (TIFOI), sobre a qualidade dos ovócitos e dos embriões produzidos. A tese foi composta por três estudos. No primeiro estudo, investigou-se se o procedimento de injeção folicular e a qualidade técnica da TIFOI afetam a recuperação ovocitária, a dinâmica folicular e a competência para o desenvolvimento embrionário. As variações das injeções mostram que quando tecnicamente adequadas e com menor número de ovócitos resultaram em maior taxa de recuperação (P<0,05) e maior proporção de blastocistos aptos à criopreservação (P<0,05), com taxas de prenhez semelhantes às obtidas com a MIV. Em seguida, avaliou-se a atividade metabólica, mitocondrial e o perfil epigenético dos embriões produzidos pela MIV e TIFOI. Os embriões TIFOI apresentaram menor acúmulo de lipídios, maior criotolerância e perfil de expressão gênica compatível com melhor equilíbrio metabólico em relação à MIV (P<0,05). Por fim, realizou-se um perfil lipidômico em três estágios do desenvolvimento (ovócitos MII, blastocistos D7 e embriões D14), demonstrando que a TIFOI deixa uma assinatura metabólica persistente ao longo do desenvolvimento embrionário, de caráter intermediário, mais próxima dos FSH e distinta dos ovócitos e embriões MIV, especialmente em relação ao acúmulo de triglicerídeos e redução de acilcarnitinas. Em conjunto, os dados demonstram que a TIFOI constitui uma alternativa viável e biologicamente relevante à maturação, ao promover um ambiente folicular mais fisiológico que favorece a qualidade ovocitária, a competência embrionária e o metabolismo lipídico xiv durante o desenvolvimento inicial, sobretudo para técnicas que requerem ovócitos de alta qualidade, como a clonagem e edição gênica.