Estudo proteômico das proteínas de plasmodium falciparum exportadas até a membrana plasmática das hemácias infectadas

Abstract

Plasmodium falciparum é o principal agente etiológico da malária. Durante a fase eritrocitária do ciclo biológico, é capaz de remodelar intensamente os eritrócitos infectados, exportando diversas proteínas que alteram suas propriedades estruturais e funcionais. Esse conjunto de proteínas, conhecido como exportoma, desempenhampapéis essenciais na adesão endotelial, evasão imune e aumento da permeabilidade da membrana. Apesar de sua importância, a composição funcional das proteínas exportadas até a superfície da célula hospedeira ainda é pouco compreendida. Neste sentido, o presente estudo teve como objetivo caracterizar as proteínas exportadas por P. falciparum até a membrana plasmática dos eritrócitos humanos por meio de análise proteômica. A estratégia experimental incluiu o cultivo da cepa 3D7, sincronização com sorbitol e purificação de formas maduras por gradiente de Percoll®. Com o objetivo de rotular as proteínas parasitárias expostas ou próximas à superfície eritrocitária, foram empregadas três abordagens de biotinilação seletiva: Sulfo-NHS LC-Biotina, Maleimida-PEG2-Biotina e APEX2. As proteínas biotiniladas foram purificadas por afinidade com estreptavidina e analisadas por espectrometria de massas. Foram identificadas diversas proteínas associadas à fração membranar, incluindo PfEMP1 e KAHRP, amplamente reconhecidas por sua atuação na adesão e na modulação da resposta imune. Adicionalmente, foram detectadas proteínas relacionadas ao tráfego intracelular, ao citoesqueleto e ao complexo PTEX, sugerindo uma organização funcional complexa no processo de exportação. As proteínas identificadas representam candidatos relevantes para o desenvolvimento de novas intervenções terapêuticas e vacinais, por estarem expostas na interface parasito-hospedeiro. Este estudo contribui significativamente para o entendimento dos mecanismos moleculares de remodelamento eritrocitário induzido por P. falciparum e fornece uma base sólida para futuras investigações funcionais e translacionais.