Avaliação dos sinais não-motores e da segurança do peptídeo nanoencapsulado Fraternina-10 em um modelo experimental da doença de Parkinson

Abstract

A Doença de Parkinson (DP) é uma doença neurodegenerativa, que tem como marco histopatológico inicial a perda de neurônios dopaminérgicos na região da Substantia Nigra, afetando cerca de 10 milhões de pessoas ao redor do mundo. Adicionalmente aos sinais motores característicos da doença, existem sinais não-motores que também fazem parte da doença, como as disfunções gastrointestinais, distúrbios do sono, déficits cognitivos, depressão e ansiedade. Dessa forma, a maioria dos sinais não-motores impactam a qualidade de vida em 98% da população que possui a DP, no entanto, os tratamentos utilizados não aliviam ou reduzem esse impacto. Sendo assim, é de suma importância a avaliação dos sinais não-motores quando se estuda o desenvolvimento de novos possíveis tratamentos. A Fraternina-10 apresentou potencial terapêutico para a DP, mas apresentou toxicidade nas doses aplicadas e nenhuma análise para o alívio de sinais não-motores foi realizada. Sendo assim, com o intuito de reduzir a toxicidade e melhorar a biodisponibilidade, foi feita a associação do peptídeo a uma nanopartícula. Nesse sentindo, o objetivo desse trabalho foi padronizar um modelo com a presença de sinais nãomotores, utilizando a neurotoxina 6-OHDA, para que seja avaliada a ação do peptídeo associado a uma nanopartícula, assim como a mudança de efeitos adversos do peptídeo. Após a obtenção, a Nanopartícula apresentou estabilidade em suas características físico-químicas durante um período de 120 dias. Foram testadas 3 doses de Fraternina-10 associadas a nanopartícula (NF10) (20, 10 e 5 µg/animal) e 3 doses do peptídeo na sua forma livre (20, 10 e 5 µg/animal) em protocolo de toxicidade de dose única. Nesse protocolo de toxicidade de dose única,os tratamentos não demonstraram efeitos adversos, exceto pelo grupo tratado com NF-10 na maior dose de 20 µg/animal. Visando a padronização do modelo não-motor foram testadas duas doses de 6-OHDA 40 e 30 µg/animal, por apresentar mudanças significativas no comportamento do tipo ansioso no teste de labirinto em cruz elevado (LCE), a dose escolhida foi a de 30 µg/animal. Após a padronização da dose de 6-OHDA, foram feitos o teste de LCE para avaliação de comportamento do tipo ansioso, campo aberto, para análise motora e comportamental, e teste de reconhecimento de objeto novo (TRON), para a análise de consolidação de memória de longo prazo. Para os ensaios, foram utilizados os seguintes grupos, veículo, 6-OHDA (30 µg/animal) e NF-10 em sua dose terapêutica (10 µg/animal). O grupo NF-10 apresentou uma melhora em relação ao comportamento do tipo ansioso gerado pela 6-OHDA. Nenhuma diferença motora no campo aberto foi vista entre o grupo 6-OHDA e veículo. No entanto, o grupo NF-10 demonstrou piora motora. No TRON, o grupo 6-OHDA apresentou déficit cognitivo em relação ao grupo veículo, já o grupo do tratamento não apresentou melhora em relação ao grupo 6-OHDA. Os resultados indicam que foi possível replicar sinais não-motores em um modelo de 6-OHDA e que o peptídeo nanoencapsulado reverteu os efeitos reduzindo os comportamentos do tipo ansiosos.