Caracterização morfo-molecular e patogenicidade dos isolados de Phytophthora e Lasiodiplodia causando doenças em cacaueiro no Equador

Abstract

O cacaueiro (Theobroma cacao L.) é a espécie mais importante do gênero Theobroma devido à sua ampla distribuição geográfica e comercialização mundial do chocolate produzido a partir das amêndoas dos frutos. O Equador ocupa a sétima posição mundial entre os países produtores de cacau. O litoral é a principal região produtora de cacau do Equador, embora a cultura seja cultivada em 16 das 24 províncias. O cacaueiro cultivado na região litorânea possui alta produtividade e incidência de doenças como a podridão parda e a morte descendente. A podridão parda é causada por espécies de Phytophthora enquanto um complexo de espécies de Lasiodiplodia causam a morte descendente. A identificação precisa desses patógenos tem sido realizada por comparação de características morfológicas em combinação com dados moleculares de diferentes regiões genômicas. Essa abordagem tem revelado a descoberta de novas espécies e/ou novos relatos de patógenos em várias culturas agrícolas. Baseado nessas informações, acredita-se que a podridão parda e a morte descendente do cacaueiro no Equador sejam causadas por diferentes espécies de Phytophthora e Lasiodiplodia, respectivamente. Portanto, os objetivos desse trabalho são: (i) identificar as espécies de Phytophthora associadas com a podridão parda, (ii) identificar as espécies de Lasiodiplodia associadas com a morte descendente, (iii) determinar a patogenicidade e agressividade dos isolados de Phytophthora e Lasiodiplodia, e (iv) atualizar a lista de patógenos associados ao cacaueiro no Equador. Frutos com sintomas de podridão parda e tecidos de plantas com sintomas da morte descendente foram coletados nas províncias de Esmeraldas, Guayas, Los Ríos, Manabí, Morona Santiago, Pichincha e Santo Domingo de los Tsáchilas para isolamento indireto. Para identificação prévia, a região parcial do gene β-tubulina (Phytophthora spp.) ou fator de elongação (Lasiodiplodia spp.) foi amplificada e sequenciada. Posteriormente, isolados representativos foram selecionados para o sequenciamento adicional das regiões genômicas ITS e COX2 para Phytophthora spp., e ITS, β-TUB e RPB2 para Lasiodiplodia spp. As sequências nucleotídicas foram comparadas e adicionadas ao banco de dados do GenBank para análises de Inferência Bayesiana (IB). Entre os 181 isolados de Phytophthora coletados de frutos e ramos do cacaueiro, somente P. palmivora foi identificada. As análises filogenéticas confirmam que os 166 isolados de Lasiodiplodia pertencem às espécies L. theobromae, L. pseudotheobromae, L. brasiliensis e L. laeliocattleyae, sendo que as duas últimas são relatadas pela primeira vez como agente causal da morte descendente do cacaueiro. Todas as espécies encontradas foram patogênicas no cacaueiro. O esclarecimento da etiologia da podridão parda e morte descendente é fundamental para o direcionamento dos programas de melhoramento e controle eficiente das doenças do cacaueiro no Equador.