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Please use this identifier to cite or link to this item: https://repositorio.unb.br/handle/10482/25950
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Title: Involvement of G proteins and cAMP in the production of chitinolytic enzymes by Trichoderma harzianum
Envolvimento de proteínas G e cAMP na produção de enzimas quitinolíticas por Trichoderma harzianum
Authors: Firmino, Alexandre A.P.
Ulhoa, Cirano J.
Sousa, Marcelo V.
Ferreira Filho, Edivaldo X.
Ricart, Carlos A.O.
Assunto:: Trichoderma
N-acetylglucosaminidase
chitinase
cAMP
G protein
Trichoderma
N-acetilglicosaminidase
quitinase
cAMP
proteína G
Issue Date: 2002
Publisher: Sociedade Brasileira de Microbiologia
Citation: Braz. J. Microbiol.,v.33,n.2,p.169-173,2002
Abstract: The effect of G protein modulators and cyclic AMP (cAMP) on N-acetylglucosaminidase (NAGase) production was investigated during 84 h of growth of a Trichoderma harzianum strain in chitin-containing medium. Caffeine (5 mM), N6--2'-O-dibutyryladenosine 3'5'-cyclic monophosphate sodium salt (dBcAMP) (1 mM) and 3-isobutyl-1-methylxanthine (IBMX) (2 mM) decreased extracellular NAGase activity by 80%, 77% and 37%, respectively. AlCl3/KF (100 µM/10 mM and 200 µM/ 20 mM) decreased the activity by 85% and 95%, respectively. Cholera (10 µ/mL) and pertussis (20 µ/mL) toxins also affected NAGase activity, causing a decrease of approximately 75%. Upon all treatments, protein bands of approximately 73 kDa, 68 kDa and 45 kDa had their signals diminished whilst a 50 kDa band was enhanced only by treatment with cholera and pertussis toxins. N-terminal sequencing analysis identified the 73 kDa and 68 kDa proteins as being T. harzianum NAGase in two different truncated forms whereas the 45 kDa band comprised a T. harzianum endochitinase. The 50 kDa protein showed sequence similarity to Coriolus vesicolor cellobiohydrolase. The above results suggest that a signaling pathway comprising G-proteins, adenylate cyclase and cAMP may be involved in the synthesis of T. harzianum chitinases.
O efeito de cAMP e de moduladores de proteínas G sobre a produção de N-acetilglicosaminidase (NAGase) foi investigado durante o crescimento de Trichoderma harzianum em meio contendo quitina. Cafeína (5 mM), dBcAMP (1mM) e IBMX (2 mM) provocaram diminuições na atividade extracelular de NAGase em 80%, 77% e 37%, respectivamente. Por outro lado, a presença de AlCl3/KF nas concentrações de 100 µM/10 mM e 200 µM/ 20 mM causou decréscimo na atividade em 85% e 95%, respectivamente. A toxina do cólera (10 µ/mL) e a toxina pertussis (20 µ/mL) também afetaram a atividade de NAGase, causando um decréscimo de aproximadamente 75%. Análises eletroforéticas mostraram que todos os tratamentos citados causaram diminuição no sinal de bandas correspondendo a polipeptídios de 73 kDa, 68 kDa e 45 kDa, enquanto uma banda de 50 kDa foi intensificada apenas com tratamento com as toxinas do cólera e pertussis. Análises de sequenciamento N-terminal permitiram a identificação das proteínas de 73 kDa e 68 kDa como sendo NAGase de T. harzianum em duas formas diferentemente processadas enquanto a banda de 45 kDa correspondeu a uma endoquitinase de T. harzianum. A proteína de 50 kDa mostrou similaridade de sequência com uma celobiohidrolase de Coriolus vesicolor. Os resultados sugerem que uma via de sinalização composta por proteínas G, adenilato ciclase e cAMP possa estar envolvida na produção de quitinases T. harzianum.
DOI: https://dx.doi.org/10.1590/S1517-83822002000200015
Appears in Collections:Uso interno - em processamento

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