Título:	Produção em biorreator de um peptídeo antimicrobiano com o uso do marcador ELP-Inteína
Autor(es):	Sousa, Daniel Amaro
Orientador(es):	Franco, Octávio Luiz
Coorientador(es):	Mulder, Kelly Cristina Leite
Assunto:	Peptídeos antimicrobianos Biorreator Patologia - Brasil
Data de publicação:	13-Fev-2017
Data de defesa:	12-Set-2016
Referência:	SOUSA, Daniel Amaro. Produção em biorreator de um peptídeo antimicrobiano com o uso do marcador ELP-Inteína. 2016. 88 f., il. Tese (Doutorado em Patologia Molecular) — Universidade de Brasília, Brasília, 2016.
Abstract:	One of the most important aspects related to infectious pathogens may be correlated to an exceptional adaptability in developing resistance, which leads to a challenge in the discovery of antimicrobial drugs with novel mechanisms of action. Among them, antimicrobial peptides (AMPs) stand out as promising anti-infective molecules. In order to overcome the high costs associated with isolation from natural sources or chemical synthesis of AMPs we propose the expression of Pa-MAP 2, a polyalanine AMP. Pa-MAP 2 was fused to an ELP-intein tag where the ELP was used to promote aggregation and fast and cost-effective isolation after expression, and the intein was used to stimulate a controlled AMP release. For these, the vector pET21a was used to produce Pa-MAP 2 fused to the N-termini region of a modified Mxe GyrA intein followed by 60 repetitions of ELP. Purified Pa-MAP 2 showed a MIC of 25 μM against E. coli ATCC 8739. Batch fermentation demonstrated that Pa-MAP 2 can be produced in both rich and defined media at yields 50-fold higher than reported for other AMPs produced by the ELP-intein system, and in comparable yields to expression systems with protease or chemical cleavage. Therefore, the methodology applied here contributes to the biotechnological application of AMPs. Our results show a comparison of different fermentation conditions to obtain high yields of Pa-MAP 2 using the ELP-intein system, contributing to including these molecules as future alternatives to conventional antibiotics in the pharmaceutical field.
Unidade Acadêmica:	Faculdade de Medicina (FM)
Informações adicionais:	Tese (doutorado) — Universidade de Brasília, Faculdade de Medicina, Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular, 2016.
Programa de pós-graduação:	Programa de Pós-Graduação em Patologia Molecular
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DOI:	http://dx.doi.org/10.26512/2016.07.T.22491
Aparece nas coleções:	Teses, dissertações e produtos pós-doutorado

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